一文讀懂助溶劑：小試劑如何發(fā)揮大作用

難溶性藥物與加入的第三種物質(zhì)在溶劑中形成可溶性分子間的絡(luò)合物、締合物或復(fù)鹽等，以增加藥物在溶劑中的溶解度，這第三種物質(zhì)稱為助溶劑（Hydrotropicagent）。一般來說，助溶劑可溶于水，多為低分子化合物，與藥物形成絡(luò)合物后，可數(shù)倍甚至數(shù)十倍增加藥物的溶解度。

聚乙二醇是一種高分子聚合物，可用于藥物緩釋和固定化酶的載體、醫(yī)用高分子材料表面改性等多種方面的研究。

能與一些有機(jī)分子形成包合物，從而增加這些物質(zhì)在水中的溶解度和穩(wěn)定性，常用于增溶難溶性藥物或生物活性成分。

Tween-80/Triton X-100：形成膠束，幫助溶解脂類、膜蛋白。注意：高濃度可能破壞細(xì)胞膜！

SDS（十二烷基硫酸鈉）：強(qiáng)變性劑，溶解膜蛋白和疏水多肽。

可以有效的幫助脂溶性強(qiáng)的化合物溶解，可作為藥物分子的載體，是常用的助溶劑/增溶劑。

緩沖溶劑用途：

維持pH穩(wěn)定，保護(hù)生物分子活性（如酶、DNA、蛋白質(zhì)）。

常見溶劑：

PBS（磷酸鹽緩沖液）：細(xì)胞清洗、免疫組化。

Tris-HCl：核酸電泳、蛋白質(zhì)純化。

HEPES：細(xì)胞培養(yǎng)、酶反應(yīng)體系。

注意：助溶劑作用機(jī)制多樣，能提高難溶物溶解度且具有選擇性，不改變主成分性質(zhì)，在生物領(lǐng)域生物相容性良好。但使用時(shí)需嚴(yán)格控制用量范圍，依據(jù)溶質(zhì)特性選擇，用于生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí)做好安全性評(píng)估。

如何選擇實(shí)驗(yàn)溶劑

1-蛋白質(zhì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)

1、維持蛋白質(zhì)活性：

在研究蛋白質(zhì)活性時(shí)，常用緩沖溶液，如磷酸緩沖液（PBS）。因其能維持穩(wěn)定 pH 值，接近蛋白質(zhì)的生理環(huán)境，可避免蛋白質(zhì)因 pH 波動(dòng)而變性。

2、蛋白質(zhì)純化：

對(duì)于蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)，除了緩沖液，還可能用到含溫和去污劑的溶液。如 Triton X-100，可溶解細(xì)胞膜等脂質(zhì)成分，幫助釋放蛋白質(zhì)，同時(shí)盡量減少對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞，利于后續(xù)的分離純化步驟。

3、蛋白質(zhì)結(jié)晶：

進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)晶實(shí)驗(yàn)，為促進(jìn)蛋白質(zhì)有序排列形成晶體，常選用特定 pH 值和離子強(qiáng)度的緩沖溶液。例如，在一些蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)解析實(shí)驗(yàn)中，會(huì)使用含有硫酸銨、氯化鈉等鹽類的緩沖體系，調(diào)節(jié)溶液條件，促使蛋白質(zhì)結(jié)晶。

2-核酸相關(guān)實(shí)驗(yàn)

1、核酸提取：

在從細(xì)胞或組織中提取核酸時(shí)，常使用酚 - 氯-仿混合液。酚能使蛋白質(zhì)變性，氯-仿可促進(jìn)相分離，將蛋白質(zhì)沉淀到有機(jī)相和水相的界面，核酸則保留在水相，從而實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)等雜質(zhì)的有效分離。

2、核酸雜交：

核酸雜交實(shí)驗(yàn)需要保證核酸分子準(zhǔn)確配對(duì)雜交，常用含特定鹽離子濃度的緩沖液，如 SSC 緩沖液。它能調(diào)節(jié)溶液離子強(qiáng)度，促進(jìn)核酸分子的復(fù)性和雜交反應(yīng)，確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。

3、核酸擴(kuò)增（PCR）：

PCR 實(shí)驗(yàn)對(duì)反應(yīng)體系要求嚴(yán)格，一般使用 Tris-HCl 緩沖液作為溶劑基礎(chǔ)。其可維持反應(yīng)體系的 pH 穩(wěn)定。

3-細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)

1、細(xì)胞培養(yǎng)：

細(xì)胞培養(yǎng)需要模擬體內(nèi)環(huán)境，水是基礎(chǔ)溶劑，搭配各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組成培養(yǎng)液。例如，常用的 DMEM 培養(yǎng)基，以水為溶劑，添加了氨基酸、維生素等成分，為細(xì)胞生長(zhǎng)提供所需營(yíng)養(yǎng)，維持細(xì)胞正常生理功能。

2、細(xì)胞凍存：

細(xì)胞凍存時(shí)，為防止細(xì)胞在低溫下受損，會(huì)使用含有保護(hù)劑的溶劑。如含 10% 二甲基亞砜（DMSO）的胎牛血清，DMSO 能降低細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，減少對(duì)細(xì)胞的損傷，幫助細(xì)胞在低溫下長(zhǎng)期保存。

3、細(xì)胞染色：

細(xì)胞染色實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)不同染色劑的性質(zhì)選擇溶劑。如用蘇木-精 - 伊紅（HE）染色時(shí)，蘇木-精染液常用乙醇作為溶劑，伊紅染液則以水為溶劑。

4-脂質(zhì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)

1、脂質(zhì)提取：

脂質(zhì)不溶于水，提取脂質(zhì)常用有機(jī)溶劑。如氯-仿 - 甲醇混合溶劑，能有效溶解各類脂質(zhì)。

2、脂質(zhì)體的制備：

制備脂質(zhì)體時(shí)，常用氯-仿、甲醇等有機(jī)溶劑溶解脂質(zhì)材料。

3、脂肪酸分析：

在脂肪酸分析實(shí)驗(yàn)中，正己烷是常用溶劑。它能提取樣品中的脂肪酸，且在后續(xù)的氣相色譜分析等過程中，不會(huì)對(duì)脂肪酸的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5-動(dòng)物相關(guān)實(shí)驗(yàn)

考慮藥物性質(zhì)，脂溶性藥物如紫杉醇常用PEG-400 溶解；再考慮動(dòng)物生理特性，小鼠對(duì)少量 DMSO 耐受性較好，兔子則較差；還需適配給藥方式，口服難溶性藥物可選羧甲基纖維素鈉溶液，如給大鼠灌胃中藥提取物，注射給藥要依據(jù)不同注射類型選合適溶劑，像肌肉注射常用生理鹽水。